18世纪的罗马尼亚，23岁的美丽女子莱恩(克莉丝汀娜•罗根 饰)是个孤儿，在马戏团卖艺为生，马戏团的演出指导和大力士经常以刀割或是水泼的手段虐待她，看着可怜的莱恩流血或是皮肤烧灼起疱成了一些变态观众最热衷的节目，因为莱恩受伤时的生理表现与常人有着很大不同。孤独的莱恩只有剑术女演员阿曼达一位朋友。大力士一直垂涎于莱恩的美丽，一夜借着酒醉，意欲侵犯莱恩。莱恩在拼命反抗的瞬间，脑海中突然浮现出5岁时母亲被施暴杀害的画面，暴怒下的莱恩一下咬住了大力士的喉咙，她第一次尝到了吸食人血的滋味，也爆发出异于常人的超能力。大力士的被杀在马戏团中激起了千层巨浪，人们想方设法地围捕莱恩，杀性大起的莱恩对于任何一个冒犯自己的人决不手下留情，结果误杀了好友阿曼达，万分懊悔的莱恩带着阿曼达的剑，逃入了森林。
吸血鬼猎手弗拉基米尔(迈克尔•麦德森 饰)与塞巴斯蒂安(马修•戴维斯 饰)是硫磺会的成员，该组织旨在消灭吸血鬼，听闻莱恩消息的二人赶到马戏团时只是发现了一地的尸体。亡命天涯的莱恩决定不再袭击人类，并急于弄清自己的身世，路遇的女巫对她讲明了事实的真相：原来她是人与吸血鬼混交的后代，强暴并最终杀害她母亲的凶手正是她的父亲——法力巨大的“吸血鬼之王”卡甘(本•金斯利 饰)，但卡甘的领地戒备森严，她想要进入并接近卡甘的唯一可能就是找到“眼之护符”——一件卡甘寻找多年的神器。与此同时，卡甘也得知了自己多年之前留下的“人鬼孽种”莱恩依旧活在世上，便派出得力手下多马斯特(威尔•安德森 饰)寻找其下落并伺机除掉。
避开了隐修院的重重机关与森严护卫，莱恩得到了“眼之护符”，准备离开时，不期而遇的僧王却告诉她：世间共有“眼、心、肋”三件护符，卡甘已经占有“肋之护符”，一旦三件护符全都落入卡甘之手，他就会拥有统治全世界的能力，世间将陷入永恒的黑暗，吸血鬼横行的时代就会来临，取得了“眼之护符”的莱恩有义务肩负起保卫全人类的责任。闻讯赶来的多马斯特击伤了莱恩，并将其胁持到吸血鬼李奥尼德的属地，尾随而至的弗拉基米尔与塞巴斯蒂安与吸血鬼一方展开了激战，终日花天酒地的李奥尼德一命归西，虚弱的莱恩被救到了硫磺会的属地。见到猎手队长卡塔琳(米歇尔•罗德里格兹 饰)后，莱恩和盘托出了自己的身世与使命，从而取得了硫磺会的信任，接受了吸血鬼猎手的正规培训，并配备了全新的武器装备。
然而，令人始料未及的是，卡塔琳已经叛变投入了卡甘的麾下，在她的策应下，硫磺会的属地陷入了一片血海，伤亡惨重。莱恩与欲将“心之护符”献于卡甘邀功的卡塔琳狭路相逢，一番水下激战过后，莱恩吸乾了卡塔琳的血，大大恢复了元气。以呈献护符的名义来到吸血鬼城堡的莱恩，在企图接近卡甘时被多马斯特拿下，关入了地牢，急于攻城的弗拉基米尔、塞巴斯蒂安也随之深陷囹圄。卡甘即将占有全部的三个护符，人类的前途命运岌岌可危！
在莱恩的巧妙计划下，成功脱逃后的弗拉基米尔、塞巴斯蒂安与卡甘展开了誓死决战，最终，卡甘被制服，莱恩获得了自由，但弗拉基米尔在激战中丧命，塞巴斯蒂安也身负重伤，在莱恩的深情救治下，塞巴斯蒂安获得了永生，成为了吸血鬼的一员……
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